Un tub de centrifugă este un tub simplu care poate rezista la viteze de rotație și presiune mare, cum ar fi separarea unor probe și separarea sedimentelor supernatante.Tubul centrifugei de ultrafiltrare are două părți similare tubului interior și tubului exterior.Tubul interior este o membrană cu o anumită greutate moleculară.În timpul centrifugării de mare viteză, cei cu o greutate moleculară mai mică se vor scurge în tubul inferior (adică tubul exterior), iar cei cu o greutate moleculară mai mare vor fi prinși în tubul superior (adică tubul interior).Acesta este principiul ultrafiltrației și este adesea folosit pentru concentrarea probelor.
Tuburile centrifuge de ultrafiltrare pot fi utilizate de obicei fără pretratare, dar pentru prelucrarea probelor de proteine, în special pentru soluțiile de proteine diluate (< 10ug/ml), viteza de recuperare a concentrației cu membranele de ultrafiltrare nu este adesea cantitativă.Deși materialele PES minimizează adsorbția nespecifică, unele proteine, mai ales atunci când sunt diluate, pot avea probleme.Gradul de legare nespecifică variază în funcție de structura proteinelor individuale.Proteinele care conțin domenii încărcate sau hidrofobe au mai multe șanse să se lege ireversibil de diferite suprafețe.Pretratamentul de pasivizare pe suprafața tubului de centrifugare de ultrafiltrare poate reduce pierderea de adsorbție a proteinelor pe suprafața membranei.În cele mai multe cazuri, pretratarea coloanei înainte de concentrarea soluției de proteine diluate poate îmbunătăți rata de recuperare, deoarece soluția poate umple locurile de adsorbție a proteinei goale expuse pe membrană și suprafață.Metoda de pasivare este de a preînmuia coloana cu un volum mai mare de soluție de pasivare pentru mai mult de 1 oră, de a spăla bine coloana cu apă distilată și apoi de a o centrifuga o dată cu apă distilată pentru a îndepărta complet soluția de pasivare care poate rămâne pe film. .Aveți grijă să nu lăsați filmul să se usuce după pasivare.Dacă doriți să-l folosiți mai târziu, trebuie să adăugați apă distilată sterilă pentru a menține filmul umed.
Tuburile centrifuge cu ultrafiltrare nu pot fi de obicei sterilizate și reutilizate.Deoarece prețul unui singur tub nu este ieftin, mulți oameni încearcă să-l refolosească – experiența este de a curăța suprafața membranei cu apă distilată de mai multe ori și de a o centrifuga o dată sau de două ori.Tubul mic care poate fi centrifugat invers poate fi scufundat în apă distilată și apoi centrifugat invers de mai multe ori, ceea ce va fi mai bine.Poate fi utilizat pentru aceeași probă în mod repetat și poate fi înmuiat în apă distilată atunci când nu este utilizat, dar contaminarea bacteriană trebuie prevenită.Nu amestecați mostre diferite.Unii oameni spun că înmuierea în alcool 20% și 1n NaOH (hidroxid de sodiu) poate preveni creșterea bacteriilor și poate preveni uscarea.Atâta timp cât membrana de ultrafiltrare invadează apa, aceasta nu poate fi lăsată să se usuce.Cu toate acestea, alții spun că va distruge structura membranei.În orice caz, producătorii nu acceptă în general reutilizarea.Utilizarea repetată va bloca dimensiunea porilor membranei filtrului și chiar va provoca scurgeri de lichid, ceea ce va afecta rezultatele experimentale.
Ora postării: 05-09-2022